Saderīgi dēļi | 1, 3, 5, 8. |
Filtrēšana | pūšanas filtrēšana, sūkšanas filtrēšana |
Injekcijas portu skaits | 5, 6, 7, 8, 9, 10. |
Saderīgi plākšņu veidi | C18 plāksne, dziļurbuma plāksne, sintētiskā plāksne (saderīga ar lielāko daļu sintētisko plākšņu), mikrotitra plāksne |
Modulis | viena ass vai divas ass |
spriegums | 220V |
Garantija | 1 gads |
Pielāgots | Pieņemts |
1. Gēla elektroforēzes hromatogrāfijas attīrīšana
Attīrīšanai izmantojiet denaturējošu poliakrilamīda gēla elektroforēzes hromatogrāfiju.Denaturējošais līdzeklis parasti ir 4M formamīds vai 7M urīnviela, akrilamīda koncentrācija ir no 5 līdz 15%, un metakriamīda īpatsvars galvenokārt ir no 2 līdz 10%.
Pēc elektroforēzes ultravioletā gaismā ir jānosaka nukleīnskābes joslas pozīcija, nogriež gēlu, kas satur mērķa nukleīnskābi, nukleīnskābi sasmalcina un izskalo, un pēc tam izskalojuma šķīdumu koncentrē, atsāļo, kvantificēts un liofilizēts.
2. DMT-On, HPLC attīrīšana
Sintēzes laikā izvēlieties DMT-On režīmu, neapstrādāts produkts tika centrifugēts un koncentrēts istabas temperatūrā, lai pēc aminolīzes noņemtu lieko amonjaku.
Atdalīšana tika veikta, izmantojot C18 kolonnu ar acetonitrilu un 10% trietilamīna etiķskābi (TEAA) kā eluentu.Pēc eluēšanas pabeigšanas to koncentrē un pēc tam DMT grupu atdala ar trifluoretiķskābi.Pēc neitralizācijas daži sāļi un mazas molekulas tiek noņemtas caur nogrieztu cauruli un visbeidzot atsāļotas.
Ar šo metodi var iegūt produktu ar augstāku tīrības pakāpi, taču ir jāpievērš uzmanība depurinācijas rašanās gadījumam.
3. DMT-Off, HPLC attīrīšana
Sintēzes laikā izvēlieties DMT-Off, un neapstrādātais produkts tika centrifugēts un koncentrēts istabas temperatūrā, lai pēc amonolīzes noņemtu lieko amonjaku.
Atdalīšana tika veikta, izmantojot C18 kolonnu ar acetonitrilu un 10% trietilamīna etiķskābi ūdenī kā eluentu.Kad atdalīšana ir pabeigta un kvantitatīvi noteikta, alikvotās daļas tiek liofilizētas.
Šī metode prasa rūpīgu atdalīšanas apstākļu pielāgošanu, kā arī var iegūt salīdzinoši tīras mērķa molekulas.